Range of factors in the reduction of hyperhydricity associated with in vitro shoots of Salvia santolinifolia Bioss / Gama de fatores na redução da hiperidricidade associada a brotos in vitro de Salvia santolinifolia Bioss

Hyperhydricity is a serious physiological disorder and affects In vitro propagation of many plants and as well of Salvia santolinifolia. The donor material to initiate the in vitro culture was the callus taken from the in vitro shoots produced on Murashig and Skoogs (MS) medium at 4.0 mg/l BA. This callus formed numerous hyperhydric shoots on culturing upon the medium of the same composition. The aim was to systematically evaluate the effect of cytokinins (Benzyladnine (BA) and N6-(-2-isopentenyl) adenine (2iP), culture vessels magnitude, medium solidification, source of nitrogen and calcium chloride for the alleviation of hyperhydricity. In the tissue cultures of S. santolinifolia BA and 2iP induced severe hyperhydricity, when other factors i.e. culture vessels magnitude and a suitable concentration of agar, ammonium nitrate (NH4NO3), potassium nitrate (KNO3) & calcium chloride (CaCl2.2H2O) were not optimized. After 30 days' culture, we observed 83.82% hyperhydric shoots at increased level (1.5 mg/l 2iP) and 81.59% at decreased levels (1.0 mg/l 2iP). On the other hand, hyperhydricity percentage at decreased (0.4%) and at increased (0.8%) levels of agar were 72.37% and 39.08%, respectively. MS medium modification with NH4NO3 (412 mg/l), KNO3 (475 mg/l) and CaCl2.2H2O (880 mg/l) was found the best medium to reduced hyperhydricity (23.6%).

A hiperidricidade é um distúrbio fisiológico sério e afeta a propagação in vitro de muitas plantas e também da Salvia santolinifolia. O material doador para iniciar a cultura in vitro foi o calo retirado dos brotos in vitro produzidos em meio Murashig e Skoogs (MS) a 4,0 mg / l BA. Esse calo formou numerosos rebentos hiperídricos em cultura no meio da mesma composição. O objetivo foi avaliar sistematicamente o efeito das citocininas (Benziladnina (BA) e N6 - (- 2-isopentenil) adenina (2iP), magnitude dos vasos de cultura, solidificação do meio, fonte de nitrogênio e cloreto de cálcio para o alívio da hiperidricidade. culturas de tecidos de S. santolinifolia BA e 2iP induziram hiperidricidade severa, quando outros fatores, como magnitude dos vasos de cultura e uma concentração adequada de ágar, nitrato de amônio (NH4NO3), nitrato de potássio (KNO3) e cloreto de cálcio (CaCl2.2H2O), não foram otimizados. Após 30 dias de cultura, observamos 83,82% de brotos hiperídricos em níveis aumentados (1,5 mg / l 2iP) e 81,59% em níveis reduzidos (1,0 mg / l 2iP). Por outro lado, a porcentagem de hiperidricidade diminuiu (0,4%) e em níveis aumentados (0,8%) de ágar foram 72,37% e 39,08%, respectivamente. A modificação do meio MS com NH4NO3 (412 mg / l), KNO3 (475 mg / l) e CaCl2.2H2O (880 mg / l) foi encontrada melhor hiperidricidade média a reduzida (23,6%).

Effect of Rhizophagus intraradices on growth of Salvia miltiorrhiza / 中国中药杂志

The study aimed to explore the effects of inoculation of Rhizophagus intraradices on the biomass, effective component content, and endogenous hormone content of Salvia miltiorrhiza through pot experiments. The number of leaves, plant height, dry weight of aboveground and underground parts, branch number, root number, root length, root diameter, and other biomass were mea-sured by weighing and counting methods. The content of salvianolic acid B, caffeic acid, rosmarinic acid, tanshinone Ⅰ, tanshinone Ⅱ_A, cryptotanshinone, and other effective components was determined by ultra-high performance liquid chromatography. The content of ABA and GA_3 was determined by triple quadrupole mass spectrometry. The correlations between biomass and effective components and between effective components and plant hormones ABA and GA_3 were analyzed. The results showed that R. intraradices significan-tly increased the aboveground dry weight, leaf number, and root number of S. miltiorrhiza by 0.24-0.65 times, respectively. The content of salvianolic acid B and rosmarinic acid in the aboveground part and the content of salvianolic acid B, caffeic acid, rosmarinic acid, tanshinone Ⅰ, and tanshinone Ⅱ_A in the underground part were significantly increased by 0.44-1.78 times, respectively. R. intraradices infection significantly increased the GA_3/ABA values of aboveground and underground parts by 3.82 and 76.47 times, respectively. The correlation analysis showed that caffeic acid, the effective component of the aboveground part, was significantly positively correlated with plant height, tanshinone Ⅱ_A, the effective component of the underground part, was significantly positively correlated with biomass root number, cryptotanshinone, and dry weight, while rosmarinic acid was significantly negatively correlated with dry weight. There were significant positive correlations between cryptotanshinone and ABA, tanshinone Ⅱ_A and ABA and GA_3, and caffeic acid and GA_3. In conclusion, R. intraradices can promote the accumulation of biomass and secondary metabolites of S. miltiorrhiza and regulate the balance between plant hormones ABA and GA_3, thereby promoting the growth of S. miltiorrhiza.

Growth regulators and their reflection on different hop genotypes cultivated under in vitro conditions / Reguladores de crescimento e seu reflexo em diferentes genótipos de lúpulo cultivados in vitro

Hops is a new culture in Brazil. Tissue culture can be an important technique for rapid hop propagation. This paper aims to characterize responses from different genotypes under different growth regulators through the interrelationship of response variables important to hop in vitro growth. Three genotypes were cultivated in six culture media with different combinations of growth regulators, BAP (6-benzylaminopurine), IAA (3-indolacetic acid) and GA3 (gibberellic acid). The means were compared by orthogonal contrasts and the interrelationship of the response variables was performed by path analysis. American genotypes showed favorable root development under the BAP + IAA combination, while the use of IAA improved shoot development. The origin of genotypes was important for defining the best protocol for in vitro cultivation. The path coefficient showed that the variable number of shoots has stronger direct effect on the number of nodal segments. Additionally, in tissue culture assays, the use of a covariable and proper error distribution significantly increased experimental accuracy.

O lúpulo é uma nova cultura no Brasil. A cultura de tecidos pode ser uma técnica importante para a propagação rápida do lúpulo. Este artigo tem como objetivo caracterizar respostas de diferentes genótipos sob diferentes reguladores de crescimento através da inter-relação de variáveis de resposta importantes para o crescimento in vitro. Três genótipos foram cultivados em seis meios de cultura com diferentes combinações de reguladores de crescimento, BAP (6-benzilaminopurina), AIA (ácido 3-indolacético) e GA3 (ácido giberélico). As médias foram comparadas por contrastes ortogonais e a inter-relação das variáveis de resposta foi realizada por análise de trilha. Os genótipos americanos apresentaram desenvolvimento radicular favorável sob a combinação BAP + AIA, enquanto o uso do AIA melhorou o desenvolvimento da parte aérea. A origem dos genótipos foi importante para definir o melhor protocolo para o cultivo in vitro. O coeficiente de trilha mostrou que a variável número de brotos tem um efeito direto mais forte no número de segmentos nodais. Adicionalmente, em experimentos com cultura de tecidos, o uso de uma covariável e distribuição de erro adequada aumentou significativamente a precisão experimental.

The application of ammonium sulphate and amino acid on cotton: effects on can improve growth, yield, quality and nitrogen absorption / Aplicação de sulfato de amônio e aminoácido no algodão: efeitos sobre o crescimento, o rendimento, a qualidade e a absorção de nitrogênio

A field study was carried out to determine the influence of foliage applied plant growth promoter and retardant in improving soil applied sulphur fertilizer use efficiency in cotton during two consecutive summers 2014 and 2015. Experimental trial comprised of three different sources of sulphur (ammonium sulphate, potassium sulphate and elemental sulphur) and foliar spray of plant growth promoter and growth retardant including tap water was taken as control. Among treatments soil applied ammonium sulphate with foliage applied amino acid produced maximum plant height, sympodial branches, pods per plant, seed cotton yield, fiber yield, biological yield, protein contents, oil contents and leaf nitrogen uptake as compared to the other treatments. Whereas, soil applied potassium sulphate with foliar spray of mepiquat chloride on cotton significantly improved the boll weight and leaf potassium uptake. We conclude that soil applied ammonium sulphate and foliage spray of amino acid was more effective in improving the productivity and quality attributes of cotton.

Foi realizado um estudo de campo para determinar a influência do promotor de crescimento das plantas e retardador da folhagem em algodão, para melhora da eficiência do uso de fertilizantes à base de enxofre aplicados no solo durante dois verões consecutivos (2014 e 2015). O ensaio experimental foi composto de três fontes diferentes de enxofre (sulfato de amônio, sulfato de potássio e enxofre elementar) e pulverização foliar do promotor de crescimento de plantas e retardador de crescimento, incluindo água da torneira que foi tomada como controle. Entre os tratamentos, o sulfato de amônio aplicado no solo com aminoácido aplicado na folhagem produziu o máximo na altura da planta, ramos simodiais, capulhos por planta, rendimento de algodão em caroço, rendimento de fibra, rendimento biológico, conteúdo de proteínas, conteúdo de óleo e absorção de nitrogênio nas folhas quando comparado a outros tratamentos. Enquanto o solo fertilizado com sulfato de potássio e aplicação foliar de cloreto de mepiquat no algodão melhorou, significativamente, o peso do capulho e a absorção de potássio nas folhas. Sulfato de amônio aplicado no solo e a aplicação foliar de aminoácidos foram mais eficazes na melhora dos atributos de produtividade e qualidade do algodão.

Sumatran fleabane (Conyza sumatrensis [Retz.] E. Walker) control in soybean with combinations of burndown and preemergence herbicides applied in the off-season

Sumatran fleabane (Conyza sumatrensis [Retz.] E. Walker) can be found in many different agricultural environments and impact different crops, such as soybeans and corn. It is believed that the application of burndown and preemergence herbicides in the off-season are effective in controlling Sumatran fleabane in soybean crops. The objective was to evaluate the effectiveness of burndown and preemergence herbicides in the off-season, with one or two applications, in the control of Sumatran fleabane in soybean cultivation. Five field experiments were conducted in Maripá, state of Paraná (PR), Brazil. The treatments consisted of the application of burndown herbicides in combinations with preemergence ones, with one or two applications. Control of Sumatran fleabane and soybean yield were evaluated. With the set of experiments, it is highlighted that the strategy combining more applications, with different herbicides, burndown and preemergence, is more promising in the control of Sumatran fleabane. When comparing synthetic auxins, dicamba and triclopyr stand out. For sequential application, worse performance was observed for diquat. Combinations between burndown and preemergence herbicides were effective in controlling Sumatran fleabane, for pre sowing application in soybean. With emphasis on managements with sequential applications of saflufenacil with glufosinate or glyphosate. The strategy combining more applications, with different herbicides, burndown and preemergence herbicides, is more promising in the control of Sumatran fleabane.

Evaluation of root-knot nematode disease control and plant growth promotion potential of biofertilizer Ning shield on Trichosanthes kirilowii in the field

Abstract Biofertilizer Ning shield was composed of different strains of plant growth promotion bacteria. In this study, the plant growth promotion and root-knot nematode disease control potential on Trichosanthes kirilowii in the field were evaluated. The application of Ning shield significantly reduced the diseases severity caused by Meloidogyne incognita, the biocontrol efficacy could reached up to 51.08%. Ning shield could also promote the growth of T. kirilowii in the field by increasing seedling emergence, height and the root weight. The results showed that the Ning shield could enhance the production yield up to 36.26%. Ning shield could also promote the plant growth by increasing the contents of available nitrogen, phosphorus, potassium and organic matter, and increasing the contents of leaf chlorophyll and carotenoid pigment. Moreover, Ning shield could efficiently enhance the medicinal compositions of Trichosanthes, referring to the polysaccharides and trichosanthin. Therefore, Ning shield is a promising biofertilizer, which can offer beneficial effects to T. kirilowii growers, including the plant growth promotion, the biological control of root-knot disease and enhancement of the yield and the medicinal quality.

Induction and growth pattern of callus from Piper permucronatum leaves / Indução e padrão de crescimento de calos de folhas de Piper permucronatum

ABSTRACT Piper permucronatum is a perennial shrub, a medicinal plant native to the Amazon Rainforest. Traditionally, the tea of its leaves is used to combat menstrual and intestinal cramps, stomach pain, digestive problems, diarrhea, hemorrhage, and nausea. Its leaf’s essential oil is effective against Aedes aegypti larvae; its flavones and flavanones have a fungicidal effect against Clamidosporium cladosporioides and C. sphaerospermum; its hexanic extract is effective against Leishmania amazonensis. The objective of this study was to provide a protocol for callus induction from P. permucronatum leaves and an identification of the callus growth pattern, focusing on the deceleration phase, when the callus cells must be subcultured into liquid medium in order to produce a cell suspension cultures. Leaf explants were inoculated in a solid MS medium supplemented with factorial combinations of 2,4-D, BA, NAA and GA3. Callus formation was evaluated weekly until the 49th day. Subsequently, new explants were inoculated at the hormonal combination that resulted in the highest callus cell proliferation and, every seven days during a period of 70 days, samples were dried and weighed to determine the callus growth pattern. NAA and GA3 were not effective for callus induction. Combinations of 2,4-D and BA resulted in callus induction and proliferation. The highest percentage of callus induction was observed with the combination of 4.52 µM 2,4-D and 4.44 µM BA. The calluses thereby produced were friable and whitish. The callus growth pattern followed a sigmoid shape. The deceleration phase started on the 56th day of culture.

RESUMO Indução e padrão de crescimento de calos de folhas de Piper permucronatum. Piper permucronatum é um arbusto perene, uma planta medicinal native da Floresta Amazônica. Tradicionalmente, o chá de suas folhas é usado em casos de cólicas menstruais e intestinais, dores de estômago, problemas digestivos, diarreia, hemorragia e náusea. O óleo essencial das folhas é efetivo contra a larva de Aedes aegypti; suas flavonas e flavanonas têm efeito fungicida contra Clamidosporium cladosporioides e C. sphaerospermum; seu extrato hexânico é efetivo contra Leishmania amazonensis. O objetivo deste trabalho foi determinar um protocolo para indução de calos em folhas de P. permucronatum e identificar o padrão de crescimento dos calos, com foco na fase de desaceleração, quando as células de calo devem ser subcultivadas em meio líquido para produzir culturas de células em suspensão. Explantes foliares foram inoculados em meio MS sólido suplementado com combinações fatoriais de 2,4-D, BAP, ANA e GA3. A formação de calos foi avaliada semanalmente até o 49º dia. Posteriormente, novos explantes foram inoculados na combinação hormonal que resultou na maior proliferação de células de calo e, a cada sete dias durante 70 dias, amostras foram secas e pesadas para determinar o padrão de crescimento dos calos. ANA e GA3 não foram efetivas para a indução de calos. Combinações de 2,4-D e BAP resultaram em indução e proliferação de calos. A maior porcentagem de indução de calos foi observada com a combinação de 4,52 µM de 2,4-D e 4,44 µM de BAP. Os calos produzidos eram friáveis e esbranquiçados. O crescimento dos calos seguiu um padrão sigmoide. A fase de desaceleração iniciou no 56º dia de cultivo.

Avaliação dos fitorreguladores auxina e giberelina na germinação e crescimento do arroz / Assessment of auxin and gibberellin on rice germination and growth / Evaluación de fitorreguladores auxina y giberelina en la germinación y crecimiento del arroz

O arroz (Oryza sativa L.) é uma planta da família das Poaceas (gramíneas), sendo um dos cereais mais cultivados no mundo. Os fitorreguladores como auxina e giberilina podem influenciar o crescimento e desenvolvimento das plantas como o arroz. O objetivo deste estudo foi avaliar a germinação e o crescimento do arroz sob diferentes doses de fitorreguladores (auxina e giberelina). Foram conduzidos dois experimentos, o primeiro para determinar a germinação e comprimento radicular das sementes de arroz. O segundo experimento foi conduzido para determinar a altura, massa seca da parte área (MSPA) e o conteúdo nitrogênio (N) da parte aérea (NPA). Nos dois experimentos foram testadas quatro doses de auxina + giberelina: 0 (testemunha); 200; 500 e 1000 mL ha­1. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com cinco repetições para cada tratamento nos dois experimentos. A germinação das sementes e o comprimento radicular foram aumentados com a aplicação de auxina e giberelina. A altura e o NPA foram aumentados significantemente com a aplicação de auxina e giberelina. Concluiu-se que a aplicação de auxina e giberelina na cultura do arroz aumentaram a germinação e o comprimento radicular das sementes. Além disso, aumentou a altura e o conteúdo de nitrogênio nas plantas de arroz.

Rice (Oryza sativa L.) is one of the most widely grown cereals in the world. Phytoregulators such as auxin and gibberellin can influence both growth and development of plants such as rice. The aim of this study was to assess the germination and growth of rice under different doses of phytoregulators (auxin and gibberellin). Two experiments were performed, one to determine the germination and root length of rice seeds, and the second one to evaluated height, shoot dry mass (SDM) and shoot nitrogen content (SNC). Both experiments tested four doses of auxin + gibberellin (0 (control), 200, 500 and 1000 mL ha-1). The experimental design was completely randomized with five repetitions for both experiments. The germination and root length of rice seedlings were increased by the application of auxin and gibberellin. Rice height and SNC were significantly increased with the application of auxin and gibberellin. Thus, it can be concluded that the application of auxin and gibberellin in rice increases germination, root length, plant height and nitrogen content.

El arroz (Oryza sativa L.) es una planta de la familia Poaceas (gramíneas), siendo uno de los cereales más cultivados en el mundo. Los fitorreguladores como auxina y giberelina pueden influir en el crecimiento y desarrollo de plantas, como el arroz. El objetivo de este estudio ha sido evaluar la germinación y el crecimiento del arroz bajo diferentes dosis de fitorreguladores (auxina y giberelina). Se realizaron dos experimentos, el primero para determinar la germinación y longitud de la raíz de las semillas de arroz. Se llevó a cabo un segundo experimento para determinar la altura, masa seca de la parte aérea (MSPA) y el contenido de nitrógeno (N) de la parte aérea (NPA). En ambos experimentos, se ensayaron cuatro dosis de auxina + giberelina: 0 (testigo); 200; 500 y 1000mL ha-1. El diseño experimental fue completamente al azar con cinco repeticiones para cada tratamiento en ambos experimentos. La germinación de las semillas y la longitud de la raíz se incrementaron mediante la aplicación de auxina y giberelina. La altura y el NPA se incrementaron de manera significativa mediante la aplicación de auxina y giberelina. Se concluye que la aplicación de auxina y giberelina en el cultivo de arroz incrementa la germinación y longitud de la raíz de las semillas. Además, incrementó la altura de plantas de arroz con nitrógeno.

Propagação vegetativa de Aloysia triphylla (L'Hér. ) Britton em função da concentração de AIB e do comprimento das estacas / Vegetative propagation of Aloysia triphylla (L'Hér. ) Britton according to IBA and length of cuttings

A Aloysia triphylla (L'Hér.) Britton é uma planta medicinal de porte arbustivo com folhas aromáticas que possuem óleo essencial rico em citral. A crescente demanda da indústria farmacêutica e cosmética pelo óleo essencial de A. triphylla promoveram grande interesse sobre o cultivo dessa espécie. A estaquia é um dos principais métodos de propagação devido à dificuldade em obter sementes, e também pela vantagem dos descendentes serem iguais à planta-matriz. O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de AIB e do comprimento das estacas no enraizamento de estacas de A. triphylla. O experimento foi conduzido em ambiente protegido no período de Novembro de 2010 a Janeiro de 2011. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema fatorial onde os fatores foram cinco concentrações de ácido indol butírico (AIB) (mg L-1): 0, 250, 500, 1000 e 1500, e quatro comprimentos de estaca: 4, 6, 8 e 10 cm. As estacas tiveram a base imersa em solução de AIB e foram colocadas para enraizar em substrato comercial Mecplant®. As variáveis analisadas foram: comprimento do sistema radicular, percentagem de estacas enraizadas (%), número de brotações, massa fresca e seca da parte aérea, e massa seca das raízes. Nas condições em que o estudo foi realizado os resultados mostraram que o comprimento das estacas e concentração de AIB afetam o desenvolvimento das estacas, apresentando ajuste quadrático e linear para as variáveis analisadas. As mudas obtidas a partir de estacas com 10 cm e concentração de 1500 mg L-1 de AIB apresentaram a maior percentagem de enraizamento e as maiores médias para o comprimento do sistema radicular, número de brotações, massa fresca e seca da parte aérea.

Aloysia triphylla (L'Hér.) Britton is a medicinal plant shrub with aromatic leaves, which have essential oil rich in citral. The increasing demand of the pharmaceutical and cosmetic industries for the A. triphyllaessential oil provided a greater interest in the cultivation of this species. Cutting is one of the main methods of propagation, due to the difficulty in obtaining seeds and also for the benefit of descendants being equal to the parent plant. The objective of this study was to evaluate the effect of different concentrations of IBA and length of cuttings in the rooting of A. triphylla. The experiment was carried out in a protected environment in the period from November 2010 to January 2011. The experimental design was completely randomized using the factorial design where the factors were five concentrations of indole butyric acid (IBA) (mg L-1): 0, 250, 500, 1000 and 1500, and four lengthsforthe cuttings: 4, 6, 8 and 10 cm. The cutting base was immersed in a solution of IBA and placed into the rooting Mecplant ® commercial substrate. The variables analyzed were: root length, percentage of rooted cuttings (%), number of shoots, fresh and dry weight of the shoots, and dry weight of the roots. Under the conditions in which the study was conducted, the results showed that the length of the cuttings and IBA concentration affect the development of the cuttings, with linear and quadratic adjustment for the variables analyzed. The seedlings of cuttings with 10cm and the concentration of 1500 mg L-1 IBA showed the highest percentage of rooting and the highest averages for length of the root system, number of shoots, fresh and dry weight of the shoots.

Influência de diferentes concentrações dos fitorreguladores ácido 6-benzilaminopurina e ácido naftalenoacético na propagação vegetativa de Malva sylvestris L / Effect of different BAP and NAA concentration on microprapagation of Malva (Malva sylvestris L. )

Malva sylvestris L. (família Malvaceae), conhecida como malva, é uma espécie medicinal nativa da Europa, cultivada no sul do Brasil. A espécie tem propriedade adstringente, suaviza a irritação dos tecidos e reduz inflamações, entre outras características e atributos medicinais. O estudo teve como objetivo verificar a eficiência dos hormônios ANA (ácido naftalenoacético) e BAP (ácido 6-Benzilaminopurina) na propagação vegetativa a partir do estabelecimento in vitro de segmentos nodais. Segmentos nodais obtidos de plantas matrizes mantidas em casa de vegetação foram submetidos à desinfestação e inoculados em meio MS (Murashige e Skoog) com diferentes concentrações e combinações de ANA (ácido naftalenoacético) e BAP (ácido 6-Benzilaminopurina) totalizando oito tratamentos com 60 repetições cada. Os explantes foram mantidos em sala de crescimento e, ao completar sete dias, as plântulas obtidas foram retiradas e avaliadas quanto ao número de folhas, altura total (cm) e massa fresca (g). As plântulas foram fixadas em substrato "Big bio" e transferidas para casa de vegetação com nebulização. Os dados obtidos foram submetidos à Análise de Variância, seguido pelo Teste de Tukey. As plântulas obtidas em meio MS acrescido de 2,0 mg/Lˉ¹ de BAP e de 0,5 mg/Lˉ¹ de ANA foram as que apresentaram maior média nas três variáveis avaliadas, sendo então o mais indicado para a produção de mudas. Em 10 dias foi observado o enraizamento de todas as plântulas transferidas para casa de vegetação. A aclimatização e o enraizamento ex vitro ocorrem em uma única etapa sem a necessidade da utilização de enraizadores. A técnica desenvolvida demonstra a possibilidade de produção de mudas com custos reduzidos, em larga escala, e com a garantia de fornecer mudas aptas para o cultivo em apenas 17 dias

Effect of different BAP and NAA concentrations on malva (Malva sylvestris L.) micropropagation. Malva sylvestris L. (Malvaceae family), known as mallow, is a medicinal species native toEurope, and it is grown in southern Brazil. It has astringent properties and can sooth tissue irritation and reduce inflammations among other medicinal characteristics. The study aimed to verify the efficiency of the hormones NAA (naphthalene acetic acid) and BAP (6-Benzilaminopurine acid) in propagating the species from establishing in vitro nodal segments. Nodal segments obtained from mother plants kept in greenhouses were disinfected and inoculated in MS medium with different concentrations and combinations of BAP and NAA, amounting to 8 processes with 60 repetitions each. The explants were kept in growth rooms, and after seven days the resulting seedling were removed and assessed regarding the number of leaves, total height (cm) and fresh mass (g). Subsequently, the seedling were fixed on the substrate "Big bio" and transferred to greenhouses with nebulization. The data obtained was subjected toVariance Analysis, followed by the Tukey's test. In 10 days,rooting could be observed in all the plantules transferred to the greenhouse. The plantules obtained in MS medium thatreceived 2.0mg/L-1 BAP and 0.5 mg/L-1 NAA were the ones that presented the highest average in the three variables assessed, therefore the most recommended to producing seedlings of this species. The ex vitro acclimatization and rooting occur in a single phase without the need of root promoters. The technique developed shows that it is possible to produce seedlings of this species at reduced costs, in large scale and with the guarantee to supply seedlings that can be planted in only 17 days.

Callogenesis in leaves of Kalanchoe pinnata Lam. by 2, 4-D and BA action / Calogênese em folhas de Kalanchoe pinnata Lam. pela ação de 2, 4-D e BAP

The Kalanchoe pinnata Lam. is a bush species of the Crassulaceae that is distinguished by its important medicinal properties. Its leaves are used as cataplasm to treat headaches and wounds. There is evidence for a hypotensive and anti-inflammatory effect. Techniques of plant tissue culture have been applied to plant species that produce substances likely to be explored in pharmacology, cell suspension being the main technique. At the industrial level, this method utilizes bioreactors in order to produce secondary metabolites on a large scale. The objective of this study was to evaluate the effects of in vitro combinations of 2,4-dichlorophenoxiacetic acid (2,4-D) and benzylaminopurine (BA) on callus induction in leaf explants of K. pinnata. Leaf fragments were inoculated in MS medium supplemented with 3.0% sucrose, 0.8% agar and factorial combinations of 2,4-D (0.00, 4.52, 9.06, 18.12 µM) and BA (0.00, 4.44, 8.88, 17.76 µM). The cultures were kept in the darkness at 24±2ºC for 50 days. The percentage of callus induction and the area of explants covered by callus cells were evaluated. In the absence of growth regulators, callus induction did not occur, with necrosis of all explants. The highest percentage of callus induction was 100%, obtained with the combination of 9.06 µM 2,4-D and 8.88 µM BA, but the calluses covered only 25% of the leaf area. The most efficient combination was 4.52 µM 2,4-D and 8.88 µM BA, resulting in 91% callus induction with 50 to 100% of the explants being covered by callus cells.

Kalanchoe pinnata Lam. é uma espécie arbustiva da família Crassulaceae que apresenta interessantes propriedades medicinais. Suas folhas são utilizadas em cataplasma para tratar enxaqueca e ferimentos. Há evidência de seu efeito como hipotensiva e anti-inflamatória. Técnicas de cultura de tecidos vegetais têm sido aplicadas para espécies que possuem substâncias passíveis de exploração na farmacologia, sendo a suspensão celular a principal técnica utilizada. A nível industrial, este método utiliza biorreatores para produzir metabólitos secundários em larga escala. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos in vitro de combinações do ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) e de benzilaminopurina (BAP) na indução de calos em explantes foliares de K. pinnata. Fragmentos foliares foram inoculados em meio MS contendo 3% de sacarose, 0,8% de ágar e combinações fatoriais de 2,4-D (0,00; 4,52; 9,06 e 18,12 µM) e BAP (0,00; 4,44; 8,88 e 17,76 µM). Os cultivos foram mantidos no escuro, a 24±2ºC por 50 dias. A porcentagem de indução de calos e a área dos explantes coberta por células de calos foram avaliadas. Na ausência de reguladores de crescimento não ocorreu indução de calos, com necrose de todos os explantes. A porcentagem mais alta de indução de calos foi de 100%, obtida com a combinação de 9,06 µM de 2,4-D e 8,88 µM de BAP, mas estes calos cobriram apenas 25% da área foliar. A combinação mais eficiente foi de 9,06 µM de 2,4-D e 8,88 µM de BAP, que resultou em 91% de indução e 50 a 100% da área dos explantes coberta por células de calos.

Propagação in vitro de Hypericum cordatum (Vell. ) N. Robson (Clusiaceae) e análise fitoquímica de seus compostos secundários / In vitro propagation of Hypericum cordatum (Vell. Conc. ) N. Robson (Clusiaceae) and phytochemical analysis of its secondary compounds

Hypericum cordatum, planta com possível atividade medicinal foi analisada no presente estudo quanto a sua propagação in vitro e seus principais compostos secundários em comparação com Hypericum perforatum, espécie medicinal utilizada como antidepressivo. Diante das dificuldades que ocorrem na coleta e sua multiplicação por sementes ou via estacas caulinares, iniciou-se a propagação in vitro tendo como resultados: que a indução e o crescimento de brotações foram estimulados pelo regulador 6-benziladenina (2,0 mg L-1), que houve indução de raízes por ácido indol-butírico (0,5 mg L-1), e que as baixas concentrações de auxinas, ácido 2,4-diclorofenoxiacético, ou ácido naftalenoacético (0,01 a 0,4 mg L-1) induziram a formação de calos sendo uma alternativa viável para a multiplicação desta espécie in vitro. Constatou-se com base nas análises bioquímicas e cromatográficas realizadas nesta fase de desenvolvimento das plantas mantidas em culturas in vitro, que as mesmas não contêm hipericina. No entanto, pode-se atribuir o potencial medicinal de H. cordatum às outras substâncias que também possuem importantes atividades biológicas, tais como a xantona e o ácido clorogênico sintetizados nas glândulas foliares de H. cordatum.

Hypericum cordatum, a plant with possible medicinal activity, was analyzed in this study for its in vitro propagation and main secondary compounds, compared to Hypericum perforatum, a medicinal species used as antidepressant. Considering the difficulties that occur in its collection and multiplication through seeds or stem cuttings, in vitro propagation was started and showed the following results: the induction and the growth of sprouts were stimulated by the plant regulator 6-benzyladenine (2.0 mg L-1), there was root induction by indolebutyric acid (0.5 mg L-1) and the low concentrations of auxins, 2,4-dichlorophenoxyacetic acid or naphthaleneacetic acid (0.01 to 0.4 mg L-1) induced callus formation, constituting a viable alternative for the in vitro multiplication of this species. Biochemical and chromatographic analyses carried out at this developmental stage of plants kept in in vitro cultures indicated that they do not contain hypericin. However, the medicinal role of H. cordatum can be attributed to other substances that also have important biological activities, such as xanthone and chlorogenic acid, both synthesized in the leaf glands of H. cordatum.

Estaquia caulinar de guaçatonga (Casearia sylvestris Swartz) nas quatro estações do ano, com aplicação de diferentes concentrações de AIB / Stem cuttings of "guaçatonga" (Casearia sylvestris Swartz) in the four seasons of the year with the use of different IBA concentrations

Casearia sylvestris Swartz (Salicaceae) ou guaçatonga é uma árvore nativa do México, da América Central, e da América do Sul, com grande importância ecológica, farmacológica, e comercial. No entanto, como a maioria das espécies nativas de interesse medicinal no Brasil, a guaçatonga não é cultivada comercialmente, sendo obtida por extrativismo. O presente trabalho foi conduzido com o objetivo de testar um protocolo de propagação vegetativa de guaçatonga por meio da estaquia, visando identificar qual a melhor estação do ano para o enraizamento de estacas e avaliar o efeito da utilização do regulador vegetal ácido indolbutírico (AIB). No outono, inverno e primavera de 2007, e no verão de 2008, estacas caulinares semilenhosas de 12-14 cm de comprimento e com duas folhas foram preparadas e tratadas com AIB (0, 1000, 2000 e 3000 mg L-1), em solução alcoólica, através da imersão rápida por 10 segundos da base das estacas, e foram plantadas em tubetes contendo substrato Plantmax HT® em casa-de-vegetação sob nebulização intermitente. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com 4 repetições, 4 tratamentos, e 16 estacas por parcela. Todos os experimentos foram avaliados após 90 dias, sendo que para dois deles (primavera 2007 e verão 2008) prolongou-se o tempo de permanência em casa-de-vegetação para melhor desenvolvimento das raízes. Foram avaliados os parâmetros: porcentagem de estacas enraizadas, porcentagem de estacas vivas (com calos e sem raízes, sem calos e sem raízes), porcentagem de folhas retidas, porcentagem de estacas mortas, número de raízes, comprimento das três maiores raízes (cm), e média da massa seca das raízes (mg). Não ocorreu enraizamento nas estacas retiradas no outono e no inverno. Com as estacas retiradas na primavera obteve-se 39,1% de enraizamento. Estacas coletadas no verão não responderam como o esperado, apresentando, após 240 dias, 6,3% de enraizamento no tratamento com 3000 mg L-1 de AIB. O AIB até 3000 mg L-1 não estimulou o enraizamento de estacas de guaçatonga e a melhor estação do ano para a estaquia é a primavera.

Casearia sylvestris Swartz (Salicaceae), or "guaçatonga", is a tree native to Mexico and Central and South America, with great ecological, pharmacological and commercial relevance. Similarly to most native species of medicinal interest in Brazil, "guaçatonga" is not commercially cultivated and is obtained by means of extraction. The aim of this study was to test a protocol for the vegetative propagation of "guaçatonga" by means of stem cutting, identifying the best season for stem rooting and assessing the effect of using the growth regulator indolebutyric acid (IBA). In the fall, winter and spring 2007 and summer 2008, semi-hardwood cuttings with 12-14 cm length and two leaves were prepared and treated with IBA (0, 1000, 2000 and 3000 mg L-1), in alcohol solution, by rapidly immersing for 10 seconds the base of cuttings and planting them in tubes containing Plantmax HT® in greenhouse under intermittent nebulization. Experimental design was completely randomized with 4 replicates, 4 treatments and 16 cuttings per plot. All experiments were evaluated after 90 days, and for two of them the time of maintenance in greenhouse was prolonged in order to improve root development. The following parameters were evaluated: percentage of rooted cuttings, percentage of live cuttings (with callus and without roots, without callus and without roots), percentage of retained leaves, percentage of dead cuttings, number of roots, length of the largest roots (cm) and mean dry mass of roots (mg). There was no rooting on cuttings collected during the fall and the winter. For cuttings collected in the spring, 39.1% rooting was obtained. Cuttings collected in the summer did not show the expected results, presenting after 240 days 6.3% rooting when treated with 3000 mg L-1 IBA. Up to 3000 mg L-1, IBA did not stimulate the rooting of "guaçatonga" cuttings and the best season for cutting is spring.

Germinação assimbiótica e desenvolvimento de Dendrobium nobile Lindl. sob efeito de reguladores vegetais no tratamento pré-germinativo / Asymbiotic germination and development of Dendrobium nobile Lindl. under the effect of plant growth regulators in pre-germinative treatment

O presente trabalho teve como objetivo estudar a influência dos reguladores vegetais BAP e GA3 como tratamentos pré-germinativos no processo de germinação e desenvolvimento inicial de plântulas de Dendrobium nobile, espécie importante pelas propriedades farmacológicas como anti-oxidante, vasodilatadora e até mesmo anti-cancerígena, além do valor ornamental. Os tratamentos pré-germinativos consistiram de BAP e GA3, separadamente, nas concentrações de 0,0; 1,0; 2,0 e 5,0 mg L-1. Após seis meses da semeadura in vitro e manutenção em câmara de germinação e de crescimento com temperatura e foto-período controlados (12 horas e 23ºC ± 2), foram avaliados os parâmetros número de sementes germinadas, porcentagem de germinação, massa fresca e altura das plântulas, diâmetro e número de pseudobulbos, número de folhas, número de raízes, e o comprimento da maior raiz. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado. Todas as variáveis foram submetidas à análise de variância e de regressão, quando significativas. As sementes de D. nobile germinaram melhor na ausência de reguladores vegetais e os tratamentos com BAP ou GA3 na embebição das sementes pouco beneficiaram o desenvolvimento in vitro de D. nobile.

The present study aimed to investigate the influence of plant growth regulators BAP and GA3 as pre-germinative treatment in the process of germination and initial development of seedlings of Dendrobium nobile, a species important for its pharmacological properties like antioxidant, vasodilator and even anticancer, besides its ornamental value. Pre-germinative treatments consisted of BAP and GA3, separately, at the concentrations of 0.0; 1.0; 2.0 and 5.0 mg L-1. At six months after in vitro sowing and maintenance in a germination and growth chamber with controlled temperature and photoperiod (12 hours and 23ºC ± 2), the following parameters were evaluated: number of germinated seeds, percentage of germination, fresh mass and height of seedlings, number and diameter of pseudo-bulbs, number of leaves, number of roots, and length of the largest root. The experimental design was completely randomized. All variables underwent analysis of variance and regression analysis when significant. D. nobile seeds presented better germination in the absence of plant growth regulators and the treatments with BAP or GA3 in seed imbibition little benefited D. nobile in vitro development.

Citocininas na multiplicação in vitro de hortelã-pimenta (Mentha x Piperita L. ) / Cytokinins on in vitro multiplication of peppermint (Mentha x Piperita L. )

O hortelã-pimenta é um hibrido triplo, Mentha x piperita, utilizado de forma medicinal no tratamento de náuseas, cólicas gastrointestinais, flatulências, cálculos biliares, icterícia, ansiedade, expectoração e expulsão de vermes intestinais. Na micropropagação, o BAP (6-benzilaminopurina) e KIN (cinetina) têm sido as fontes de citocininas mais empregadas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de reguladores vegetais na multiplicação in vitro de hortelã-pimenta. Explantes constituídos de segmentos nodais provenientes de plântulas já estabelecidas in vitro com aproximadamente 0,5 cm foram inoculados em meio MS, suplementado com diferentes associações de BAP e KIN, em adição de 30 g L-1 de sacarose. As concentrações de citocininas utilizadas foram 0,0; 1,0 e 2,0 mg L-1 de BAP e 0,0; 0,5 e 1,0 mg L-1 de KIN. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, com nove tratamentos consistindo de cinco frascos cada um, sendo que cada frasco continha quatro explantes. A utilização de 2,0 mg L-1 de BAP promove a multiplicação in vitro de hortelã-pimenta, porém, diminui o índice de sobrevivência. O uso de citocininas aumenta a massa fresca e seca dos explantes e a ausência destes reguladores propicia o alongamento nesta espécie.

Peppermint is used for medical treatments of nausea, gastrointestinal cramps, flatulence, gallstones, jaundice, anxiety, sputum and expulsion of intestinal worms. In micropropagation, BAP (6-benzylaminopurine) and KIN (kinetin) have been the most widely used sources of cytokinins. The aim of this study was to evaluate the effect of plant growth regulators in multiplication of peppermint. Explants consisting of nodal segments from seedlings already established in vitro with approximately 0,5 cm were inoculated on MS medium supplemented with different combinations of BAP and KIN and 30 g L-1 of sucrose. The concentrations of cytokinins used were 0,0; 1,0 and 2,0 mg L-1 of BAP and 0,0; 0,5 and 1,0 mg L-1 of KIN. The experiment was set up in a completely randomized design with nine treatments consisting of five bottles each, and each vial contained four explants. The use of 2,0 mg L-1 of BAP promotes the in vitro multiplication of peppermint, but decreases the survival rate. Cytokinins increase fresh and dry weight of explants and the absence of these regulators provides the elongation in this specie.

Efecto de diferentes concentraciones de ácido antranílico en el crecimiento del maíz / The effect of different anthranilic acid concentrations on maize growth

La rizobacteria Azospirillum brasilense basa su capacidad promotora del crecimiento vegetal en la producciónde auxinas y otras hormonas, entre ellas el ácido antranílico (AA). En este trabajo se determinó el efectodel AA (0, 500, 1000, 3000 y 5000 ppm) en el crecimiento y la acumulación de biomasa del híbrido de maíz83G66 en condiciones de invernadero. El AA de 500 a 3000 ppm promovió un mayor crecimiento (área foliary altura de planta), y el AA de 1000 y 3000 ppm incrementó significativamente la biomasa seca en maíz encomparación con el testigo. El 90% de la asimilación del AA en las plantas ocurrió durante los primeros 10días después del tratamiento.

The plant growth-promoting ability of rhizo-bacterium Azospirillum brasilense is based on production of auxins and other hormones, among them outstanding antranilic acid (AA). In this work we determined the antranilic acid (0, 500, 1000, 3000, and 5000 ppm) effects on maize growth and dry biomass accumulation under greenhouse conditions using the hybrid 83G66. From 500 to 3000 ppm of AA significantly increased plant growth (leaf area and plant height) while 1000 and 3000 ppm of AA significantly increased dry biomass accumulation in maize compared with control (0 ppm). The 90 % of AA in maize plants was assimilated during the early 10 days after treatment.

Determination of IAA in brassinolide treated coleoptiles of wheat by a modified indirect ELISA with polyclonal antibodies.

An indirect enzyme immunoassay for detection of as little as 10-50 pmole IAA is described for the first time. The assay is based on the development of highly specific polyclonal antibodies against the carboxyl site of IAA. The binding specificity is nearly as high as the radioimmunoassay and the titre of the specific antibody was also remarkably high (1:40,000 of the primary antibody). Such an easy, rapid, specific and highly sensitive assay would be extremely useful in gaining more information on the mode of action of phytohormones, and their effects on physiological processes.